問：配培養(yǎng)基的時候調(diào)PH為7.25，分裝-20度保存，幾天后解凍再測為7.80，怎么回事啊，難不成每次配時得調(diào)到7以下嗎？解凍后重新調(diào)PH值，再過濾分裝，還能用嗎？還能－20度保存嗎？
答：根據(jù)你的闡述可斷定你用的是粉末DMEM，說明書上說應(yīng)該加3.7 g碳酸氫鈉，還說過濾的時候PH值升高0.1-0.2.但是3.7 g碳酸氫鈉對應(yīng)的是10%的CO2培養(yǎng)環(huán)境，如果你用的是5%的CO2，那么你只要加入1.85 g碳酸氫鈉就行，這時候基本不用調(diào)節(jié)PH值，然后開始過濾，過濾的時候PH會上升，但基本上也是在要求的范圍。但是即使你只加1.85 g碳酸氫鈉，時間太長的話，PH值還是會上升，因為你裝配基的瓶子不是密封的，與空氣中的CO2有接觸，而空氣中的CO2得濃度是低于5%的，那么隨時間的延長，碳酸氫鈉緩沖對在起作用，PH值又上升了，這是不可避免的。當(dāng)然可以加入HEPES，引入新的緩沖對，相對來說PH就不容易改變了。
總結(jié)：
測定培養(yǎng)基的酸堿度，常用的方法是測定其酸堿度。酸堿度范圍在1-14，酸堿度為7時是中性，往下6、5、4、3、2、1，酸性越來越強，往上8、9、10、….，堿性越來越強。酸堿度的測定，可用市售的廣譜ph試紙進行。
測定溶液的ph，可取一條廣譜ph試紙，將待測溶液滴到試紙上，然后與標準版對照，顏色相同即可表示為該值。若是測定培養(yǎng)料的ph，可稱取5克培養(yǎng)料，加入10毫升的中性水，然后攪拌、澄清，用廣譜ph試紙蘸澄清液，測定其ph試紙放入料中，將濕料壓在試紙上使其潮濕，然后再對照標準版確定ph.測定時，料要拌勻；接觸ph試紙時，雙手要干燥，以免測量失誤。
如果檢測原料ph偏酸，可加生石灰粉、1﹪-5﹪生石灰（或氫氧化鈉）溶液等進行調(diào)整；如果原料ph偏堿，可加過磷酸鈣、3﹪-5﹪稀鹽酸溶液等進行調(diào)整。
好多實驗員現(xiàn)在都不測PH值了，目測一下就差不多，只要是那種玫瑰紅色就是正常范圍，當(dāng)你對著光發(fā)現(xiàn)有紫色的時候，肯定是PH又上升了，如果太紫的話就需要重新調(diào)節(jié)PH值了。如果僅僅是一般的紫色的話沒問題，你可以試試，把培養(yǎng)瓶拿入培養(yǎng)箱中，但一定要把瓶蓋擰松，這樣幾個小時后，你的配基的PH就恢復(fù)到正常水平了，因為這時候配基接觸到了5%的CO2。
