茶多酚是茶葉中的重要品質(zhì)組成，含量多少與品種、栽培條件、加工方法有關(guān)，必須掌握其測(cè)定方法。酒石酸鐵比色法，方法簡(jiǎn)便、快速，重現(xiàn)性好，容易掌握，已列為國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法。
在一定的pH條件下，酒石酸鐵與茶多酚類物質(zhì)形成藍(lán)紫色或紅紫色的絡(luò)合物，在波長(zhǎng)540nm處比色，在適當(dāng)?shù)臐舛确秶鷥?nèi)，茶多酚的量與呈色的深淺成正比，可用分光光度法定量。本實(shí)驗(yàn)學(xué)習(xí)用酒石酸比色法測(cè)定茶多酚類物質(zhì)的方法。
一、試材及用具
1．試材 茶葉磨碎試樣
2．儀器 分光光度計(jì)、實(shí)驗(yàn)室常規(guī)玻璃儀器（三角瓶、漏斗、容量瓶、移液管、量筒等）
3．試劑
（1）酒石酸鐵溶液：稱取硫酸亞鐵(FeSO4•7H2O)1g與酒石酸鉀鈉（KNaC4H4O6•4H2O）5g，加水溶解稀釋至1L。該溶液可穩(wěn)定10 d。
（2）pH7.5的磷酸緩沖液 先配制以下兩種溶液：
a．1/15mol/L的磷酸氫二鈉溶液 稱取11.876g的Na2HPO4•2H2O，加水溶解，稀釋至1L (若用無(wú)結(jié)晶水的需稱取9.47g，若用含12個(gè)結(jié)晶水的需稱取23.872g，其余操作相同)。
b．1/15mol/L磷酸二氫鉀溶液 稱取經(jīng)110℃烘箱烘2h后的KH2PO4 9.078g，加水定容至1L。
取a液85mL和b液15mL混合后，即為pH7.5的緩沖液。
二、方法步驟
稱取茶多酚純品0.2500g，加水溶解定容至250mL，混勻，即為每毫升含1mg茶多酚的標(biāo)準(zhǔn)溶液。
2．繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線
分別稱取標(biāo)準(zhǔn)溶液0.0mL、0.5mL、1.0mL、1.5mL、2.0mL于一組25mL棕色容量瓶中，各加水至5mL，再加酒石酸鐵溶液5mL，加緩沖液至刻度，混勻后用10mm比色皿，以試劑空白作參比，于波長(zhǎng)540nm處測(cè)定吸光度，繪制出標(biāo)準(zhǔn)曲線。
3．茶湯制備
準(zhǔn)確稱取磨碎試樣3g，加450mL沸水，在沸水浴中浸提45min，每隔10min搖瓶一次，過(guò)濾。洗滌殘?jiān)?，濾液合并于500mL容量瓶中，加水定容至刻度，搖勻。
4．測(cè)定
準(zhǔn)確吸取茶湯1mL，注入25mL容量瓶中，加水4mL，酒石酸鐵溶液5mL，用緩沖液定容至刻度，混勻。用10mm比色皿，以試劑空白作參比，于波長(zhǎng)540nm處測(cè)吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線查得溶液含茶多酚的量。
