實(shí)驗(yàn)材料 市售大而新鮮的胡蘿卜
試劑、試劑盒 1. MS 培養(yǎng)基 10 mg/L 2,4-D 2 mg/L 6-BA 2. 70% 乙醇3. 0.1% 升
儀器、耗材 1. 超凈工作臺(tái)2. **鍋3. 顯微鏡4. 接種器械5. 不銹鋼打孔器6. 燒杯（ 500ml ）7. 培養(yǎng)皿（ 9cm ）8. 移液管
實(shí)驗(yàn)步驟
1. 將胡蘿卜用自來水沖洗干凈，用刮皮刀除去表皮 1-2mm ，橫切成大約 10-40mm 厚的切片。以下步驟全部無菌操作。
2. 胡蘿卜片經(jīng) 70% 乙醇處理 30-60 秒后，無菌水沖洗一遍，再用 0.1% 升汞或飽和漂白粉溶液浸泡 10 分鐘，無菌水沖洗 3-5 次。
3. 將胡蘿卜片平放于培養(yǎng)皿中，一手用鑷子固定胡蘿卜片，一手用打孔器按平行于組織片垂直軸方向打孔。每個(gè)孔應(yīng)打在靠近維管形成層的區(qū)域，務(wù)必打穿組織。然后從組織片中抽出打孔器，用玻棒輕輕將圓柱體從打孔器中推出，放到無菌水的培養(yǎng)皿中。重復(fù)打孔步驟，直至制備足夠數(shù)量的組織圓柱體。
4. 用鑷子取出 1-2 條胡蘿卜圓柱體，放入另一含無菌水的培養(yǎng)皿中，用刀片切除圓柱體兩端各 2mm 長的組織。將剩下的組織切成厚約 2mm 的小圓片。在整個(gè)切割操作中要多次火焰**鑷子和解剖刀，冷卻后再使用。
5. 用鑷子將圓片轉(zhuǎn)到**的濾紙上（每次一片），將圓片兩面的水分吸干，并立即接種到培養(yǎng)基表面。每瓶接種 6-8 片。 注意：接種時(shí)使三角瓶呈一定的傾斜度，用手拿鑷子、灼燒等整個(gè)接種過程不要直接在培養(yǎng)基上方完成，以減少污染機(jī)會(huì)。
6. 將培養(yǎng)物置于 25℃溫箱中培養(yǎng)?？蓪⒁徊糠址旁诠庀屡囵B(yǎng)，一部分放在暗中培養(yǎng)，比較光下和暗處對誘導(dǎo)愈傷組織的反應(yīng)。
上海創(chuàng)賽科學(xué)儀器有限公司（Shanghai Canspec Scientific Instruments Co., Ltd.），是一家致力于實(shí)驗(yàn)室全套用品和設(shè)備（包括：生物、化學(xué)化工、實(shí)驗(yàn)耗材、儀器設(shè)備等）的集約化供應(yīng)商，竭誠為國內(nèi)各行業(yè)提供實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品。
