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細(xì)胞培養(yǎng)中微生物污染的排除

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系列 目錄號(hào) 規(guī)格
一次性移液管 GSP010001 1ML，**，黃色環(huán)，1支/包，500支/箱
巴斯德吸管 PP101002 0.2ML,**,1支/包,5000支/箱
一次性離心管 CFT000150 15ML,圓錐底，不**，500支/ 包，500支/ 箱
一次性微量離心管 CFT000005 0.5ML，不**，1000支/包，8000支/箱
一次性細(xì)胞培養(yǎng)板 TCP001006 6WELL,**，普通型，100個(gè)/箱
一次性細(xì)胞培養(yǎng)瓶 TCF001025 25ML，**，普通型，密封蓋，10個(gè)/包，200個(gè)/箱
一次性細(xì)胞培養(yǎng)皿 TCD000035 3.5CM,**，普通型，10個(gè)/包，960個(gè)/箱
細(xì)胞培養(yǎng)轉(zhuǎn)瓶 TCB001002 2000ML,**，懸浮細(xì)胞，密封蓋，1個(gè)/包，12個(gè)/箱
培養(yǎng)液瓶 CTF010150 150ML,**，1個(gè)/包，24個(gè)/箱
針頭式過濾器 FMC201013 MCE膜，黃色，0.22UM,13MM，100個(gè)/盒，800個(gè)/箱
真空式過濾器 FMC201150 MCE膜，150ML，0.22UL，1個(gè)/包，12個(gè)/箱
接收瓶 FRB000150 150ML,**，1個(gè)/包，24個(gè)/箱
酶標(biāo)板 FEP100096 96孔，不可拆，高結(jié)合力，10個(gè)/包，200個(gè)/箱
一次性接種環(huán)/接種針 DIL011001 1.0ul，白色，**，20支/包，2000支/箱
一次性血清板 SLP000096 96WELL,不可拆，10個(gè)/包，200個(gè)/箱
一次性血清管/樣品管 SST001015 1.5ML,可立裙邊，**，20個(gè) /包，5000個(gè)/箱
深孔板 DMP160096 1.6ML，96孔，U型底，不**，1個(gè)/包，50個(gè)/箱
一次性細(xì)胞凍存管 FCT001005 0.5ML，50個(gè)/包，5000個(gè)/箱
比色皿 CUV010045 4.5ML，10*10*45，2*光窗，100個(gè)/盒，1000個(gè)/箱
一次性PCR管 PCR100200 0.2ML,鼓蓋，8連管，125個(gè)/包，1250個(gè)/箱
一次性**培養(yǎng)皿 MCD000035 3.5CM,**，10個(gè)/包，960個(gè)/箱

      細(xì)胞受各種霉菌、**和支原體污染后，一般都較難排除或殺滅，其中以支原體更難排除，因此從預(yù)防著眼為上。
      1、*****法：
      用BM－1（截耳素衍生物）和BM－2（四環(huán)素衍生物）抑制支原體
（1）***制備：均可用PBS配成250×濃縮液－20℃?zhèn)溆?，使用濃度參考《組織培養(yǎng)和分子細(xì)胞學(xué)技術(shù)》117頁表6－2。
（2）處理：取受支原體污染的細(xì)胞，吸除培養(yǎng)液，加入含BM-1的1640培養(yǎng)液培養(yǎng)3天后，吸除培養(yǎng)液，再加入含BM-2的1640培養(yǎng)液培養(yǎng)4 天，如此連續(xù)三個(gè)輪回。
（3）檢測：用33258熒光染色鏡檢（每個(gè)輪回末應(yīng)檢測一次）。
（4）培養(yǎng)：**支原體后的細(xì)胞，在不加上述***的培養(yǎng)液中，再傳代培養(yǎng)3～4次。
（5）鏡檢：如**不徹底可再進(jìn)行處理至純凈為止（一般3個(gè)輪回即能被完全消除）。BM-1和BM-2與CIP（4-氟，2-羥基喹啉）聯(lián)合應(yīng)用亦可，即先用含BIP培養(yǎng)液培養(yǎng)12天后，再按上述方法處理。
      2、加溫**法
      把受污染的細(xì)胞置41℃中作用5～10小時(shí)。
      3、動(dòng)物體內(nèi)接種**法
      把受支原體污染的腫瘤細(xì)胞接種在同種動(dòng)物皮下或腹腔中，借動(dòng)物**系統(tǒng)消滅支原體，而腫瘤細(xì)胞卻能在體內(nèi)繼續(xù)生長，待一定時(shí)間后，從體內(nèi)取出細(xì)胞再進(jìn)行培養(yǎng)繁殖。
      4、巨噬細(xì)胞吞噬法
      從動(dòng)物腹腔采取巨噬細(xì)胞，為排除其它細(xì)胞成分，可先進(jìn)行純化，然后再加入被支原體污染的細(xì)胞培養(yǎng)液中混合培養(yǎng)。在培養(yǎng)過程中，為檢查支原體是否已被消除干凈，可利用支持物培養(yǎng)法驗(yàn)證，取出支持物逐日染色、鏡檢觀察，至支原體已被消除干凈為止。
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