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公司動態(tài)

血清使用常見問題


1、血清保存的*好方法?

建議血清*好保存在-15℃以下。若一次使用不完一瓶,建議無菌分裝于適當(dāng)?shù)?*容器內(nèi)冷凍備用。


2、如何解凍血清,才能保證其質(zhì)量不會受損?

我們建議將血清從冷凍箱取出后,置于2℃~8℃冰箱中解凍,然后在室溫下全融,解凍過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。


3、為什么血清在解凍后會出現(xiàn)絮狀沉淀?應(yīng)該怎樣處理?

血清中絮狀沉淀產(chǎn)生的原因有很多,其中*普遍的還是由于血清中脂蛋白的變性所致,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,也會存在于血清中,這也是造成沉淀的主要原因,但這些絮狀沉淀并不影響血清本身的質(zhì)量。欲去除沉淀,可采取自然沉降法或者將血清分裝于無菌離心管中,2000~3000rpm離心5min。一般不建議用過濾的方法去除絮狀沉淀,因?yàn)槌恋頃枞麨V膜,造成過濾困難或無法過濾。


4、為什么要熱滅**清?有必要熱滅活嗎?
加熱可以滅**清中的補(bǔ)體系統(tǒng),使補(bǔ)體去活化。通常未滅活的補(bǔ)體能夠刺激平滑肌收縮、肥大細(xì)胞和血小板組胺的釋放、激活**細(xì)胞和巨噬細(xì)胞,同時還能夠參與溶解細(xì)胞的過程。

諸多研究表明大多數(shù)細(xì)胞的培養(yǎng)無須進(jìn)行血清的熱滅活;而在**學(xué)研究和ES細(xì)胞、昆蟲細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞的培養(yǎng)過程中,推薦使用熱滅**清。實(shí)驗(yàn)顯示,經(jīng)正確熱滅活處理的血清,對細(xì)胞的生長只有微小的促進(jìn)或完全沒有促進(jìn)作用,而通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量,造成細(xì)胞生長速率降低。并且熱處理過的血清,沉淀物明顯增多,倒置顯微鏡下觀察呈“小黑點(diǎn)”,往往會使研究者誤以為是血清受到了污染,而把血清放于37℃中,沉淀物又會更增多,有會使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂增殖。因此我們建議若非必須,可以不進(jìn)行熱處理,既節(jié)省時間又確保質(zhì)量。


5、如何避免沉淀物的產(chǎn)生?
我們建議您在血清使用的過程中,采用正確的解凍方法(冷凍→4℃→室溫,參考Procell血清產(chǎn)品使用說明),若血清解凍時改變的溫度太大(如冷凍→37℃)非常容易產(chǎn)生沉淀物。
溫度過高、時間過久、搖晃不均勻等,都會造成沉淀增多,我們建議如非必要無須對血清進(jìn)行滅活;若必須熱滅活,應(yīng)嚴(yán)格遵守56℃,30min的原則,并隨時搖晃均勻。
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