D-熒光素鉀鹽是熒光素酶的水溶性底物，存在于多種發(fā)光生物體中。在ATP和熒光素酶的催化作用下，D-熒光素鉀被氧化，產(chǎn)生藍(lán)綠色的光(560nm)，當(dāng)?shù)孜镞^量時，產(chǎn)生的光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關(guān)。編碼熒光素酶的Luc基因是植物、**、哺乳動物細(xì)胞的常用報告基因。由于沒有背景干擾，因此可以很容易地檢測出低至0.02 pg 水平的熒光素酶。
D-熒光素鉀鹽可使luc標(biāo)記基因和熒光素酶融合蛋白在活細(xì)胞、組織和生物體的表達(dá)成像，廣泛應(yīng)用于報告基因的分析、**測定和衛(wèi)生監(jiān)控。
化學(xué)名稱：4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid potassium salt
CAS 號：115144-35-9
分子式：C11H7N2O3S2K
分子量：318.42 g/mol
純 度：99.7 %（HPLC）
應(yīng)用
體外熒光檢測：熒光素的配制
試劑：
D-熒光素鉀鹽（Gold Biotechnology catalog ID: LUCK）
分子生物學(xué)級水
培養(yǎng)基
操作步驟：
1、 用分子生物學(xué)級水準(zhǔn)備一個30mg/L（200×）的儲存液。
a． 反復(fù)巔倒翻轉(zhuǎn)直到熒光素完全溶解。
b． 可以現(xiàn)配現(xiàn)用，或者分裝好保存于-20℃。
2、 加配好的熒光素儲存液到預(yù)溫的組織培養(yǎng)基中，使熒光素的終濃度為：150ug/ml。
3、 吸出培養(yǎng)細(xì)胞（沒有培養(yǎng)基殘留）。
4、 在成像前立即加入150ug/ml的熒光素溶液到細(xì)胞中。
a． 為了加強(qiáng)信號，在成像前可以把培養(yǎng)好的細(xì)胞在37℃中短暫的孵育。
小鼠活體內(nèi)熒光檢測：熒光素的配制
試劑：
D-熒光素鉀鹽（Gold Biotechnology catalog ID: LUCK）
DPBS不含Mg2+和Ca2+
操作步驟：
1、 溶熒光素于DPBS中終濃度為：15mg/ml。
2、 用0.2um 濾膜濾滅溶液。
3、 每個小鼠每克體重注射10ul（15mg/ml）熒光素儲存液。
4、 成像前10-15min內(nèi)注射小鼠腹腔內(nèi)。
a．應(yīng)用于每個動物模型的熒光動力學(xué)研究，以確定峰值信號時間。
