描述

SR3335 是一種選擇性的 RORα 配體，直接結(jié)合到 RORα (Ki 220 nM) 而非其他 RORs，在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中，用作選擇性的 RORα反向激動(dòng)劑。

相關(guān)類(lèi)別

信號(hào)通路 >> 代謝酶/蛋白酶 >> ROR

研究領(lǐng)域 >> 代謝疾*病

靶點(diǎn)

Ki: 220 nM (RORα)[1]

體外研究

SR3335是一種選擇性RORα部分反向激動(dòng)劑。在使用[3H] 25-羥基膽固醇作為標(biāo)記的生物化學(xué)放射性配體結(jié)合測(cè)定中，顯然未標(biāo)記的SR3335劑量依賴(lài)性地競(jìng)爭(zhēng)與RORαLBD的結(jié)合。使用Cheng-Prusoff方程將Ki計(jì)算為220nM。在基于細(xì)胞的嵌合受體Gal4 DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域-NR配體結(jié)合域共轉(zhuǎn)染試驗(yàn)中，SR3335顯著抑制RORα的組成型反式激活活性（IC50 = 480 nM）（部分反向激動(dòng)劑活性），但對(duì)其活性沒(méi)有影響。 LXRα和RORγ[1]。

體內(nèi)研究

藥代動(dòng)力學(xué)研究表明，腹腔注射小鼠后，SR3335顯示出合理的暴露。評(píng)估SR3335的能力使用飲食誘導(dǎo)的肥胖（DIO）小鼠模型抑制糖異生，其中小鼠用15mg / kg bid處理，ip持續(xù)6天，然后進(jìn)行丙酮酸耐受試驗(yàn)。 SR3335處理的小鼠在丙酮酸激發(fā)后顯示較低的血漿葡萄糖水平，與抑制糖異生一致。重要的是，用SR3335治*療的小鼠在用SR3335治*療7天后體重或食物攝入沒(méi)有顯示出差異[1]。

細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

將HEK293細(xì)胞維持在補(bǔ)充有10％胎牛血清的Dulbecco改良的Eagle培養(yǎng)基（DMEM）中，37℃，5％CO 2下。維持HepG2細(xì)胞并在補(bǔ)充有10％胎牛血清的*低必需培養(yǎng)基中在37℃，5％CO 2下常規(guī)繁殖。轉(zhuǎn)染前24小時(shí)，將細(xì)胞以15×103細(xì)胞/孔的密度接種在96孔板中。使用LipofectamineTM 2000進(jìn)行轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)染后16小時(shí)，用載體或SR3335處理細(xì)胞。處理后24小時(shí)，使用Dual-GloTM熒光素酶測(cè)定系統(tǒng)測(cè)量熒光素酶活性。所示值代表來(lái)自四個(gè)獨(dú)立轉(zhuǎn)染孔的平均值±SE。實(shí)驗(yàn)重復(fù)至少三次[1]。

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

小鼠[1] 30周齡飲食誘導(dǎo)的肥胖（DIO）C57BL / 6雄性小鼠購(gòu)自Jackson Laboratories，其維持在斷奶時(shí)65％Kcal高脂肪飲食。每天（07：00h和18：00h）用15mg / kg SR3335或載體處理DIO小鼠兩次，持續(xù)6天。在治*療的第6天進(jìn)行丙酮酸耐受性試驗(yàn)。注射SR3335后早晨從小鼠中取出食物，禁食6小時(shí)，并在13:00進(jìn)行丙酮酸耐量試驗(yàn)。從尾部壓區(qū)測(cè)量時(shí)間0血糖，并通過(guò)注射2g / kg丙酮酸ip開(kāi)始丙酮酸鹽激發(fā)，然后在注射后15,30和60分鐘測(cè)量血糖。通過(guò)一次觸摸超葡萄糖計(jì)測(cè)量血糖。

參考文獻(xiàn)

[1]. Kumar N, et al. Identification of SR3335 (ML-176): a synthetic RORα selective inverse agonist. ACS Chem Biol. 2011 Mar 18;6(3):218-22.

密度

1.6±0.1 g/cm3

沸點(diǎn)

465.4±55.0 °C at 760 mmHg

分子式

C13H9F6NO3S2

分子量

405.336

閃點(diǎn)

235.3±31.5 °C

精*確質(zhì)量

404.992798

PSA

103.02000

LogP

3.74

蒸汽壓

0.0±1.2 mmHg at 25°C

折射率

1.542

t0507-1786

ml176

N-[4-(1,1,1,3,3,3-Hexafluoro-2-hydroxy-2-propanyl)phenyl]-2-thiophenesulfonamide

2-Thiophenesulfonamide, N-[4-[2,2,2-trifluoro-1-hydroxy-1-(trifluoromethyl)ethyl]phenyl]-

sr3335

cs-1044