色譜分析中色譜柱的選擇是方法開(kāi)發(fā)過(guò)程中重要的一步,對(duì)于分離效率具有重大影響。一旦選錯(cuò)了色譜柱,將會(huì)無(wú)謂地延長(zhǎng)和消耗方法開(kāi)發(fā)和優(yōu)化的時(shí)間和精力。許多實(shí)驗(yàn)室常常限制色譜柱的選用,常會(huì)將其方法建立在一種主流的色譜柱化學(xué)上。然而,隨著色譜柱技術(shù)的發(fā)展,現(xiàn)在有了差異性不斷增加的基質(zhì)顆粒和配體化學(xué)可供方法開(kāi)發(fā)時(shí)篩查選擇性和改善分離之用。
本文通過(guò)眾多不同的色譜柱在選擇性上的變化的實(shí)例,概述選擇*優(yōu)色譜柱固定相的重要性。
跨越眾多色譜柱化學(xué)的樣品篩查使用配有色譜柱管理器的ACQUITY UPLC H-Class 系統(tǒng)完成?;衔锵疵摯涡虻淖兓ㄟ^(guò)UV和MS檢測(cè)器檢測(cè)。正確選擇色譜柱對(duì)于快速建立有效的方法和*大限度地降低進(jìn)一步方法開(kāi)發(fā)和優(yōu)化的需**非常重要的。
儀器和耗材
Ziprasidone(齊拉西酮)堿降解樣品:將氫氧化鈉加入到Ziprasidone
標(biāo)準(zhǔn)溶液中,將反應(yīng)液加熱2 小時(shí),用酸中和,轉(zhuǎn)移至樣品瓶中供進(jìn)樣用。
總之,Ziprasidone(齊拉西酮)堿降解樣品表明在各種色譜柱顆粒和配體上的非常不同的選擇性。若初始選擇BEH C18 或HSS T3 則需要增加方法優(yōu)化步驟以便完全分離各個(gè)組份。相反,通過(guò)快速的寬范圍的色譜柱篩查,選擇早已表明良好分離的色譜柱則不必去做進(jìn)一步方法開(kāi)發(fā)工作。此例中,CSHC18 由于其尖銳的峰形和雜質(zhì)與主峰之間優(yōu)良的分離度而被選中。
結(jié)論
通盤(pán)考慮適宜的顆?;|(zhì)和鍵合相化學(xué)選擇色譜柱對(duì)于快速開(kāi)發(fā)有效的分離方法是一個(gè)重要工具。假如在開(kāi)發(fā)新方法時(shí)一開(kāi)始就沒(méi)選對(duì)色譜柱將會(huì)導(dǎo)致昂貴的和不必要的后續(xù)優(yōu)化試驗(yàn)。隨著色譜柱技術(shù)的進(jìn)展,有日益增多的不同基質(zhì)顆粒和配體的色譜柱可供選擇,用以優(yōu)化色譜性能。對(duì)于任何基質(zhì)中的組份分離,通過(guò)寬范圍的色譜柱化學(xué)篩查樣品的做法值得推崇。